Efectos del oxido nitrico sobre la activacion de proteinas relacionadas con las placas de adhesión focal en células acinares pancreáticas

Résumé

Hemos analizado los efectos del óxido nítrico sobre la secreción exocrina pancreática. Nuestros resultados demuestran que el NO no tiene un efecto secretor directo sobre las células acinares ni sobre las ductulares, ni tampoco media las acciones secretores de agentes como la CCK(sobre las células acinares) o la forkolina(sobre las células ductulares). Además analizamos el efecto del NO en la ruta de señalización intracelular que desencadena la fosforilación de proteínas de las placas de adhesión focal en acinos pancreáticos mediante la técnica de Western blotting. Nuestros resultados muestran que el NO estimula la fosforilación de p125FAK y paxilina en acinos pancreáticos a través de la activación de la guanilil ciclasa y la síntesis de GMPc. Además comprobamos que el calcio intracelular no es imprescindible en el proceso de fosforilación de estas proteínas tras la estimulación con NO. La CCK estimula la síntesis de NO y activa la guanilil ciclasa soluble. Hemos comprobado que el efecto de la CCK sobre la foforilación de p125FAK y paxilina está mediado, al menos en parte, por el sistema N /GMPc. Ni el NO ni el GMPc intervienen en la fosforilación de p125FAK y paxilin estimulada por CCK en un paso posterior a la activación de la PKC. El incremento en los niveles citosólicos de calcio activa la NOS,generando NO que estimula la fosforilación de p125FAK y paxilina a través de un mecanismo dependiente de GMPc.