Caracterización electrofisiológica de los transportadores concentrativos de nucleósidos CNT1 humano y CNT2 de rata y aplicaión al transporte de fármacos

Abstract

En este trabajo se han caracterizado los cotransportadores de Na+/nucleósidos de humano (hCNT1) y de rata (rCNT2) mediante su expresión heteróloga en oocitos de Xenopus laevis con técnicas de electrofisiología. Los resultados obtenidos permiten concluir los siguiente: 1,- El transportador hCNT1 transporta uridina, citidina y timidina pero no adenosina siendo ésta un inhibidor de alta afinidad de hCNT1.hCNT1 transporta los fármacos gemcitabina, 5'-DFUR, AZT y d4T. La constante de afinidad de todos los sustratos es independiente del voltaje para valores de potencial de membrana hiperpolarizantes. 2,- El transportador rCNT2 transporta adnosina, guanosina, inosina y uridina y además de fármacos formicina B, fludarabina y 5'-DFUR. La constante de afinidad de todos los sustratos de rCNT2 es independiente del voltaje para valores de potencial de membrana hiperpolarizantes. 3,- La estequiometría de hCNT1 y rCNT2 es de 2Na+:1nucleósido, lo que, unido a la alta afinidad de estos transportadores por el Na+, revela una alta capacidad concentrativa de los mismos. 4,- Además de las corrientes del estado estacionario, tanto hCNT1 como rCNT2 presentan corrientes de estado pre-estacionario que pueden utilizarse para la caracterización de sustratos e inhibidores. Las semejanzas en estas corrientes y en el patrón de dependencia del voltaje de las constantes cinéticas de los nucleósidos y del Na+, sugieren que los modelos de transporte de hCNT1 y rCNT2 son análogos entre sí y muy similares a los de otras proteínas de diferentes familias de transportadores como los transportadores concentrativos de azúcares.