Regulación de la desubiqui0nación de PCNA en Schizosaccharomyces pombe

Résumé

[ES] LAS RUTAS AGRUPADAS BAJO EL NOMBRE DE TOLERANCIA AL DAÑO, CONSTITUYEN UNO DE LOS MECANISMOS ENCARGADOS DE ASEGURAR LA SUPERVIVENCIA CELULAR, UNA VEZ SE VEA COMPROMETIDA LA INTEGRIDAD DEL GENOMA. A TRAVÉS DE LAS DOS VARIANTES EXISTENTES DENTRO DE LA TOLERANCIA AL DAÑO, LAS RUTAS ¿ERROR FREE¿ Y ¿ERROR PRONE¿, LA CÉLULA SERÁ CAPAZ DE REPLICAR LOS SITIOS DE ADN DAÑADOS QUE NO PUDIERON SER REPARADOS ANTES DEL INICIO DE LA REPLICACIÓN. LA ACTIVACIÓN DE DICHAS RUTAS CELULARES EN TODOS LOS ORGANISMOS MODELO ESTUDIADOS HASTA LA FECHA, VIENE DADA POR LA UBIQUITINACIÓN DE PCNA (DEL INGLÉS PROLIFERATING CELL NUCLEAR ANTIGEN) A TRAVÉS DE UN COMPLEJO UBIQUITINA LIGASA E2-E3. A PESAR DE QUE LAS PROTEÍNAS IMPLICADAS EN REALIZAR ESTA MODIFICACIÓN DE UBIQUITINACIÓN, ESTÁN MUY BIEN CARACTERIZADAS EN TODOS LOS EUCARIOTAS, MUY POCO SE SABE DE LAS PROTEÍNAS ENCARGADAS DE REVERTIR DICHO PROCESO DE UBIQUITINACIÓN, DESACTIVANDO ASÍ LAS RUTAS DE TOLERANCIA AL DAÑO. IDENTIFICAR A LA, O A LAS PROTEÍNAS RESPONSABLES DE HACERLO EN LA LEVADURA DE FISIÓN Schizosaccharomyces pombe, HA CONSTITUIDO EL OBJETIVO PRINCIPAL DE ESTA TESIS DOCTORAL. PARA LLEVAR A CABO NUESTRO ESTUDIO, SE CONSTRUYERON CEPAS MUTADAS PARA CADA UNA DE LAS PROTEASAS DE UBIQUITINA DESCRITAS EN S. pombe. LOS ANÁLISIS GENÉTICOS Y BIOQUÍMICOS REALIZADOS CON DICHAS CEPAS, DEMOSTRARON QUE LAS DESUBIQUITINASAS PERTENECIENTES A LA FAMILIA USP/UBP: UBP16, UBP15 Y UBP12; SON LAS PROTEASAS ENCARGADAS DE DESUBIQUITINAR A PCNA EN LA LEVADURA DE FISIÓN. ADEMÁS, ANÁLISIS DE SENSIBILIDAD A DIFERENTES AGENTES GENOTÓXICOS DE LAS CEPAS SOBRE-EXPRESORAS DE CADA UNA DE LAS UBPS MENCIONADAS, PUSIERON DE MANIFIESTO, QUE UBP16 ES LA PROTEASA QUE SOPORTA EL PAPEL PRINCIPAL EN LA DESUBIQUITINACIÓN DE PCNA.