Papel de la clatrina y del complejo AP-2 en la morfogénesis de Schizosaccharomyces Pombe

  1. León Marcos, Nagore Tamara De
Dirigida por:
  1. María Henar Valdivieso Montero Directora

Universidad de defensa: Universidad de Salamanca

Fecha de defensa: 22 de noviembre de 2013

Tribunal:
  1. María del Pilar Pérez González Presidente/a
  2. César Roncero Maíllo Secretario
  3. Esteban Veiga Chacón Vocal
  4. María Isabel González Roncero Vocal
  5. Carlos Rodríguez Vázquez de Aldana Vocal
Departamento:
  1. MICROBIOLOGÍA Y GENÉTICA

Tipo: Tesis

Resumen

[ES] La pared celular es un elemento morfogenético esencial que determina la forma final de las células y que las protege contra la lisis. En S. pombe ésta está constituida por ¿ y ß-glucano y manoproteínas y tanto la síntesis como remodelación de su estructura requiere de diferentes enzimas estrictamente reguladas. En S. pombe existe poca información de cómo se lleva a cabo la incorporación del material de membrana y sobre la regulación de las enzimas implicadas en la síntesis y remodelación de la pared celular por los mecanismos de transporte vesicular. Para abordar el estudio de cómo el tráfico vesicular mediado por clatrina afecta a la morfogénesis de S. pombe y en particular cuál es su papel en la regulación de la síntesis de la pared celular se ha analizado el papel tanto de la clatrina, mediante el análisis de diferentes mutantes de la cadena ligera de la clatrina, como el del adaptador AP-2, que interviene en el proceso de endocitosis mediada por clatrina. Se ha demostrado que la deleción de la cadena ligera de la clatrina resulta letal para las células de S. pombe y que esta letalidad se rescata al incubar las células en un medio suplementado con sorbitol. En este caso aunque las células pueden sobrevivir poseen graves defectos morfológicos, en crecimiento, en tráfico vesicular, en desarrollo sexual, etc. Se ha podido comprobar que la ausencia de Clc1p afecta drásticamente a la estabilidad de Chc1p hecho que hace que, a diferencia de otros organismos, la supervivencia de S. pombe sea más dependiente de la presencia clatrina. Además se ha demostrado que la letalidad causada por la ausencia de Clc1p se debe principalmente a defectos graves en la síntesis de la pared celular que afectan directamente a la síntesis del glucano. Los resultados obtenidos muestran que una reducción en la cantidad de clatrina causa un leve impacto en el transporte vesicular en general y en otros procesos y elementos biológicos, pero afecta gravemente a la secreción de enzimas de síntesis/remodelación de la pared celular, como las ß(1,3)glucán sintasa y endoglucanasas. En cuanto al complejo adaptador AP-2 se ha comprobado, que a diferencia de lo que se conoce hasta el momento en otros organismos unicelulares, éste forma un complejo con la clatrina y se ha demostrado que tiene un papel en la endocitosis general de S. pombe. Así mismo se ha descubierto que AP-2 puede estar interviniendo en la síntesis de la pared celular ya que su ausencia afecta a la actividad ß-glucán sintasa y hace que S. pombe sea hiper-sensible a compuestos que afectan a la integridad de la pared celular.