Inmunolocalización y función de proteínas de pared celular en el desarrollo de cicer arietinum l

Résumé

Uno de los factores que intervienen en el crecimiento y desarrollo celular es la presencia de la pared celular primaria que rodea a las células vegetales. El objetivo inicial de nuestro trabajo era el estudio de dos tipos de enzimas glicanhidrolíticas ( -fucosidasas y xiloglucan endotransglucosilasa/hidrolasa) relacionadas con las modificaciones de la red celulosa-xiloglucano, considerada el dominio responsable de la estructura de la pared celular, durante la etapa de relajación que precede al crecimiento en extensión. En Cicer arietinum, hemos caracterizados dos cDNAs, CaTPI-1 y CaTPI-2, identificados inicialmente como fucosidasas. Los resultados obtenidos en nuestro trabajo revelaron que ambos clones codificaban inhibidores de proteasas de tipo Kunitz. La función más conocida de este tipo de proteínas es su participación en los mecanismos de defensa frente a heridas, patógenos y herbívoros; sin embargo poco se sabe sobre la función fisiológica de estos inhibidores en el proceso de desarrollo. Los estudios de expresión diferencial realizados con los clones CaTPI-1 y la CaTPI-2 indican una clara relación con el proceso de crecimiento, así como un patrón de expresión típico de órganos vegetativos, a diferencia de lo que ocurre con la mayoría de los inhibidores de tipo Kunitz estudiados en leguminosas. Estudios por Western blot e inmunolocalización, indican que ambas proteínas se detectan en mayor cantidad en los extractos proteicos de paredes celulares de epicotilos jóvenes, con mayor capacidad de crecimiento, sobre todo la TPI-1, coincidiendo con el patrón de expresión diferencial de ambos clones y confirmando la implicación de estas proteínas en el desarrollo de C. arietinum. La localización de la TPI-1 en las paredes celulares de las células del protoxilema, indica su directa implicación en la xilogénesis, función propuesta recientemente para este tipo de proteínas.