Mecanismos de transporte ionico en celulas ductulares del pancreas de ratones con fibrosis quistica

Résumé

La proteína CFTR funciona como un canal aniónico de Cl- y está presente en la membrana luminal de las células ductulares pancreáticas. Nosotros utilizamos ratones knockout para el CFTR (cepa cftrtm1cam, normales y -/- (CF)) en el estudio de los mecanismos de secreción hidroelectrolítica en conductos pancreáticos aislados. Los objetivos que nos planteamos en este trabajo fue analizar la secreción de fluido estimulada por secretagogos que actúan a través de la ruta del AMPc (secretina y forskolina) y del calcio (carbacol, agonista colinérgico de receptores muscarínicos) en conductos pancreáticos de ratones CF, así como investigar los mecanismos responsables de esta secreción de fluido (ambas cosas en comparación con ratones normales) y si esta secreción se debía a fenómenos de transporte epitelial de Cl- y/o de HCO3-. Realizamos estudios funcionales, en conductos pancreáticos aislados de ratón, CF y normales, mediante técnicas de videomicroscopía digital, y de registro de pH y calcio intracelular mediante microfluorimetría. Nuestros resultados nos permiten concluir: los conductos pancreáticos del ratón secretan fluido en respuesta a la estimulación colinérgica, secreción mediada por el transporte de Cl- y HCO3-; las células ductulares pancreáticas de ratones CF secretan fluido significativamente en respuesta a secretina y forskolina , secreción mediada por el transporte de Cl- y de HCO3-; como en ratones normales, la secreción de Cl- en células ductulares pancreática CF está mediada por la actividad de un cotransportador basolateral Na+ K+ 2Cl-, y la de HCO3- por la actividad del intercambiador Na+/H+, interviniendo además un cotransportador Na+ HCO3-; los canales de Cl- dependientes de Ca2+ (CACC) no son responsables de la secreción estimulada por forskolina en células ductulares de ratones CF; en la membrana luminal de estas células existe un mecanismo de transporte iónico, que no es ni CFTR ni CACC,