Clonación y caracterización de genes relacionados con el gen chs5 de s.cerevisiae

Résumé

La parede celular es una estructura que constituye el exoesqueleto de hongos y levaduras, cuya integridad es esencial para estos organismos. Su estudio tiene interés biotecnológico, morfogenético y en la búsqueda de dianas específicas para el diseño de nuevos antifúngicos. La pared celular de la levadura Saacharomyces cerevisiae se compone de glucano, manano y quitina (este polímro constituye un 3% del peso seco de dicha estructura). El gen CHS5 participa en el proceso de biosíntesis de quitina localizando a la proteína Chs3p, la subunidad catalítica de la actividad Quitín Sintasa III (una de las tres actividades Quitín Sintasa presentes en esta levadura). Además Chs5p participa en el proceso de fusión celular durante la conjugación transportando a la proteína Fusp1p. Ciertas evidencias indican la posibilidad de la existencia de un gen parcialmente redundante con CHS5 en ambos procesos. En esta levadura no hay proteínas homólogas de Chs5p, pero existe una proteína denominada Yft1p y codificada por la fase de lectura abierta YEL043w que es la única, junto con Chs5p, en presentar un dominio Tipo III de Fibronectina (FN3) en su secuencia. Se estudió la relación funcional entre ambos genes y se comprobó que no son redundantes en los procesos de síntesis de quitina y conjugación. En el caso de la levadura Schizosaccharomyces pombe la pared celular está constituida fundamentalmente por glucanos y glactomananos, pero no posee cantidades detectables de quitina. Existe una proteína en esta levadura codificada por Chs5+ que presenta un 31% de identidad con la proteína Chs5p de S.cerevisiae y además es la única en S.pombe que posee un dominio FN3 en su secuencia. El estudio del gen chs5+ demostró que éste no está implicado en la biosíntesis de la pared celular, pero si en el proceso de fusión celular durante la conjugación.