Función de 6cd17p (rpl33a) en la biogénesis de ribosomas y en el inicio de la traducción

Resumen

Gcn4p es un activador transcripcional de al menos 539 genes en Saccharomyces cerevisiae. La expresión del gen GCN4 está regulada traduccionalmente en función de la disponibilidad de aminoácidos, por un mecanismo de "reiniciación de la traducción" que depende de cuatro fases de lectura cortas en la región líder del mRNA-GCN4 y por una serie de efectores positivos (GCN) y negativos (GCD). La caracterización genética de un mutante espontáneo gcd17 ha permitido identificar a RPL33A como un nuevo gen GCD, cuyo producto se requiere para la represión traduccional de GCN4 en S. cerevisiae. L33A es una proteína ribosómica esencial de la subunidad 60S que forma parte de una familia muy conservada de proteínas eucarióticas implicadas en unión a tRNAs. La mutación puntual rpl33a-1 determina la sustitución de la glicina en posición 76 por una arginina, en un dominio de la proteína L33A muy conservado evolutivamente. Un modelo de la estructura tridimensional de L33A predice que la G76 forma parte de un lazo externo rígido, y que la mutación no alteraría el plegamiento global de la proteína. Mutaciones sintéticas que reemplazan ciertos residuos del mismo dominio por otros básicos tienen las mismas consecuencias fenotípicas que la mutación espontánea rpl33a-1. Tanto la mutación rpl33a-1 como la sustitución de RPL33A por un alelo nulo, provocan múltiples defectos en el procesamiento de los RNAs ribosómicos y en el ensamblaje de las pre-partículas 60S, causando un grave déficit de subunidades 60S maduras en la célula. La carencia de subunidades 60S origina graves defectos en el inicio de la traducción general de mRNAs en la levadura, pero favorece la traducción del mRNA-GCN4 en particular. El mecanismo por el que ocurre este fenómeno en mutantes gcd17 se ha tratado de interpretar proponiendo varios modelos, basados en el de regulación traduccional de GCN4 e integrando los datos obtenidos en este trabajo.