Caracterizacion de los narnarvirus 20s y 23s rna de s. Cerevisiaeformacion de complejos ribonucleoproteicos entre los rnas genómicos y sus rna polimerasas virales como estrategia de supervivencia viral

Resumen

La levadura Saccharomyces cerevisiae tiene dos tipos de virus RNA denominados 20S y 23S RNA que pertenecen a la familia Narnaviridae, cuya principal caracteristica es la de no estar encapsidados. Los genomas de estos virus con un tamaño entre 2 y 3 kb codifican para RNA polimerasas dependientes de RNA, llamadas p91 y p104, respectivamente. P91 y p104 se pueden asociar con sus RNAs respectivos para formar complejos ribonucleoproteicos. En este trabajo hemos demostrado que ambos RNAs y sus proteinas se localizan en el citoplasma celular. Hemos expresado las polimerasas solas y fusionadas a la GFP y hemos comprobado que la conformacion de ambas depende de la presencia del RNA respectivo. Estos RNAs son escasos en crecimiento logaritmico pero abundantes en condiciones de estrés nutricional. Las proteinas estan agregadas en las primeras condiciones mientras que son solubles en las segundas y eso depende de su unión al RNA. Las proteínas de fusión también son capaces de asociarse al RNA. Además hemos determinado que sólo seune una protiena por cada RNA, es decir, la relación estequiométrica RNA/proteína es de 1:1. Todas las moléculas de 20S y 23S RNA por su parte, existen formando complejos rinoculeoproteicos con sus RNA polimerasas respectivas y éste es su modo de vida en el interior de la levadura. Estos RNAs, que además no tienen colas de polia y probablemente no tengan Cap, son RNAs mensajeros pero sobreviven a los mecanismos de degradación de mRNAs que la celula posee, posiblemente formando estas ribonucleoproteínas. Con el sistema de replicación "in vitro" para 20S RNA, hemos estudiado el final de la elongación de las cadenas (+) de este virus. W, una forma bicatenaria que 20S RNA lleva asociada, no forma parte del ciclo sino que es un producto secundario del mismo. Por tanto son virus RNA de cadena (+).