Utilidad de la reaccion en cadena de la polimerasa (pcr) en el diagnostico de la esquistosomosis

Résumé

La esquistosomosis representa un problema creciente en áreas no endémicas debido al aumento del número de inmigrantes y de turistas que contraen esta enfermedad. La esquistosomosis aguda no es diagnosticada de forma temprana debido a la falta de herramientas diagnósticas que sean lo suficientemente sensibles para detectar el parásito durante las primeras semanas de infección. Los métodos actualmente disponibles para el diagnóstico de la esquistosomosis humana presentan problemas de especificidad y sensibilidad. Recientemente, varios autores han desarrollado métodos diagnósticos más específicos y sensibles, principalmente basados en la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Sin embargo, estas nuevas aproximaciones se han aplicado sólo para el diagnóstico de una de las cinco especies que afectan al hombre (Schistosoma mansoni). Además, la aplicación de esta PCR específica solo se ha demostrado en muestras de sangre y heces. En este trabajo, presentamos el desarrollo de una PCR altamente sensible, que permite la amplificación género- y especie-específica de las cuatro especies de Schistosoma que principalmente causan enfermedad en el hombre. Además, aplicamos con éxito esta técnica para la detección de ADN parasitario en muestras de orina fáciles de obtener y manejar, de pacientes con esquistosomosis. Con estas muestras, encontramos un 94,4% de sensibilidad y un 99,9% de especificidad al aplicar los primers género(Schistosoma ssp.)-específicos, y un 100% de sensibilidad y un 98,9% de especificidad en la PCR especie(S. mansoni)-específica. Igualmente hemos desarrollado una aproximación diagnóstica basada en la detección de ADN parasitario por la PCR en orina, comparando la utilidad de esta nueva aproximación con aquella de las dos herramientas más comúnmente utilizadas en el diagnostico de la esquistosomosis (Kato-Katz y ELISA), así como con la PCR en heces. Esta comparación se hizo en un modelo experimental murino d