Valor de la línea celular murina fbmd-1 para el estudio de las células hematopoyéticas humanas

Resumen

El estroma humano procedente de poblaciones celulares de médulas óseas (MO) de donantes sanos, es el sustrato utilizado habitualmente como microambiente estándar para estudiar "in vitro" la funcionalidad de los progenitores hematopoyéticos humanos. Una alternativa a la utilización de MO normales es la utilización de líneas celulares de estroma que sean capaces de soportar la hematopoyesis humana. En el presente trabajo intentamos comprobar si el estroma murino FMBD-1 tiene la misma capacidad del estroma normal humano para sustentar la hematopoyesis humana tanto normal como patológica. Se realizaron CLP en dos etapas y en paralelo estableciendo la capa de estroma con células de MO de donantes sanos y con la línea murina FMBD-1. Se realizaron segundos inóculos con: 55 productos de aféresis, 17 MO normales, 39 MO de pacientes con SMD y 12 MO de pacientes con LMC Ph(+) en el momento del diagnóstico. Los cultivo se valoraron por la producción de progenitores granulomonocíticos (CFU-GM) y células mononucleadas (CMN) al sobrenadante. El ánalisis de los CLP realizados mostró que la cantidad total y semanal de CMN y CFU-GM fue significativamente superior en los cultivos establecidos sobre estroma normal humano. Los progenitores inmaduros estudiados mediante CLP sobre estroma FBMD-1 se correlacionaron significativamente con los progenitores analizados mediante otras metodologías; ensayos Delta (r=0,976; p= 0,001) y células CD34+ analizadas por citometría de flujo (r=0,690; p=0,010). No encotramos correlación entre los resultados obtenidos cuando se utiliza humano. En los pacientes con LMC, las células Ph(+), analizadas por FISH, disminuyeron progresivamente tras el CLP con un comportamiento similar con ambas capas. En conclusión, el estroma humano promueve de forma más eficaz la proliferación de las células progenitoras hematopoyéticas. Sin embargo, el estroma FBMD-1 parece ser más útil para estandarizar la me