Protección hepática contra el estrés oxidativoinvestigación del mecanismo de acción celular de la silibinina en hepatocitos de rata en perifusión. Estudios metabólicos y mitocondriales

Abstract

ANTECEDENTES: La Silibinina (SB) es el principal flavonoide de la Silimarina, un extracto estandarizado de Silibum Marianum, utilizado por sus efectos hepatoprotectores en medicina humana (Legalon). Está bien documentado que la SB tiene efectos hepatoprotectores contra el estrés oxidativo y contra la hepatotoxicidad producida por múltiples sustancias tóxicas. OBJETIVOS: Investigar "in vitro", los efectos metabólicos y mitocondriales de SB en hepatocitos de rata en perifusión utilizando la nueva técnica de perifusión de células instalada en nuestro laboratorio, y por primera vez en España. MÉTODOS: Se investigó la glicólisis y la gluconeogénesis (GNG) hepática y sus influencias por la SB en hepatocitos en perifusión. Se analizaron los intermediarios extracelulares en perifusato (glucosa, piruvato y lactato), y los intracellulares en muestras de células (dihidroxiacetonafosfato, glucosa-6-fosfato, fructosa-6-fosfato, 3-fosfoglicerato y fosfoenolpiruvato). RESULTADOS: En presencia de distintos sustratos, gluconeogénicos: (la dihidroxiacetona, lactato/piruvato y fructosa) La SB indujo una marcada inhibición de la gluconeogénesis hepática asociada a una disminución importante de la hidrólisis de la glucosa-6-fosfato. Además, la SB antagonizó los efectos pro-diabéticos hepáticos del glucagón disminuyendo el aumento de la gluconeogénesis inducido por esta hormona además de disminuir el aumento de la glucogenólisis inducido por el glucagón. Finalmente, hemos demostrado que la silibinina ejerce una inhibición directa y dosis-dependiente de la glucosa-6-fosfatasa que puede explicar la disminución de la hidrólisis de la glucosa-6-fosfato. En cuanto a los efectos mitocondriales de la SB hemos demostrado que la silibinina ejerce una inhibición dosis-dependiente de la respiración en los hepatocitos intactos y en las mitocondrias aisladas, sin afectar el rendimiento de la fosforilación oxidativa. Estos efectos mitocondriales pueden explicar en parte los efectos hepatoprotectores de la silibinina. CONCLUSIÓN: La Silibinina inhibe la gluconeogénesis hepática mediante un efecto inhibidor directo sobre la enzima gluconeogénica más importante: laglucosa-6-fosfatasa. Este nuevo sugiere su uso en el tratamiento de la diabetes tipo 2.