Estudio de la biodiversidad de las poblaciones de rhizobium que establecen simbiosis con trébol en españa

Resumen

El trébol es una leguminosa forrajera que crece en suelos con valores de pH extremos y de características edáficas y químicas muy diversas. Esta leguminosa es comúnmente considerada como un hospedador restrictivo para la nodulación y habitualmente es nodulado por cepas de Rhizobium leguminosarum bv trifolii. No obstante, las investigaciones sobre la diversidad de los microsimbiontes de Trifolium ha permanecido detenida por mucho tiempo, por lo que es necesario llevar a cabo estudios más amplios utilizando diferentes criterios que permitan profundizar en el conocimiento de esta simbiosis. En este estudio se han analizado 43 cepas aisladas a partir de nódulos efectivos de Trifolium repens y Trifolium pratense procedentes de suelos con diferentes características edáficas de la provincia de Salamanca. Los aislados fueron distribuidos de acuerdo con su perfil de TP-RAPD en 9 grupos distintos. Todos los grupos mostraron perfiles idénticos de RFLP del gen ribosómico 16S. Este perfil fué idéntico al de Rhizobium leguminosarum bv trifolii y diferente al de los biovares viciae y phaseoli. La secuenciación completa del gen ribosómico 16S confirmó estos resultados mosctrando una similitud cercana al 100% con respecto a R. leguminosarum bv trifolii ATCC 14480. Se obtuvieron las secuencias de los genes atpD, recA de una cepa representativa de cada uno de los grupos de TP-RAPD. La secuencia de estos genes mostraron que la mayoría de los aislados de este estudio pertenecían a nuevas especies filogenéticamente cercanas a R. leguminosarum bv trifolii ATCC 14480. Estos datos ratifican los obtenidos a partir de las secuencia de la región intergénica entre 16S-23S (ITS). Los experimentos de hibridación DNA-DNA mostraron la existencia de al menos 4 nuevas especies.