Mecanismos de regulación de la actividad del proto-oncogen vab

Resumen

Las proteínas Vav son factores de intercambio de nucléotidos de guanina para las GTPasas Rho/Rac. En el primer capítulo de este trabajo, hemos caracterizado las propiedades reguladoras, catalíticas y funcionales de la proteína Vav de Drosophila melanogaster. Estos análisis muestran que la proteína Vav de Drosophila puede desencadenar transformación oncogénica, cambio morfológico y aumento de la motilidad celular en células de mamífero como consecuencia de una actividad catalítica conservada. Estudios de ganancia de función con moscas transgénicas apoyan la implicación de esta proteína en procesos de desarrollo embrionario dependientes del citoesqueleto como el cierre dorsal, la fusión de mioblastos, el desarrollo de las tráqueas y la migración de varios tipos celulares. Estos resultados indican que los mecanismos intramoleculares que controlan la actividad enzimática de las proteínas Vav se establecieron en una etapa muy temprana de la evolución. El segundo capítulo de la tesis explora el papel de Vav en la translocación de las GTPasas Rho/Rac desde el citosol a la membrana plasmática. Mediante una estrategia experimental basada en la localización de Vav1 en diferentes localizaciones subcelulares observamos que la localización de Rac1 activada depende de la localización del factor de intercambio. Así, la asociación de Vav1 al Golgi promueve la localización de Rac1 en este orgánulo. Por el contrario, la activación de Rac1 por proteínas Vav localizadas en el citosol, la membrana plasmática o el retículo endoplásmico conduce siempre a la translocación de la GTPasa a la membrana celular. Esta translocación ocurre de una manera independiente de la asociación al factor de intercambio o a RhoGDI y requiere la estimulación de rutas de transducción de Rac1 que modulan el citoesqueleto y la agregación de balsas lipídicas en la membrana plasmática. Estos resultados revelan un nuevo mecanismo de regulación que asegura la localización adecuada de Rac1 durante la señalización celular.