Análisis funcional de las proteínas bgs, subunidades catalíticas de la b (1,3) glucán sintasa de schizosaccharomyces pombe

Résumé

La pared celular es una estructura adecuada para la búsqueda de nuevos agentes antifúngicos, ya que es una estructura selectiva y vital para la célula fúngica. Hemos realizado el estudio comparativo de los mecanismos de acción de las tres familias de antifúngicos específicos contra la síntesis de ß(1,3)glucano: Papulacandina, Enfumafungina, Equinocandina y su derivado comercial Cancidas. Hemos hecho también un estudio comparativo funcional de las proteínas Bgs1p, Bgs3p y Bgs4p, esenciales para la célula vegetativa. El Cancidas ha mostrado ser el mejor antifúngico in vivo de las tres familias analizadas, mostrando una CMI mucho menor que el resto de antifúngicos ensayados. También ha mostrado una notable capacidad inhibitoria in vitro sobre la actividad ß(1,3)glucán sintasa, 100 veces superior a la de otros antifúngicos. No obstante, la Papulacandina ha resultado tener una capacidad inhibitoria 100 veces mayor que el Cancidas. Su patrón de inhibición in vitro de la actividad ß(1,3)glucán sintasa se divide en tres etapas. Todos los procesos de resistencia a antifúngicos específicos contra la síntesis del ß(1,3)glucano están conferidos únicamente por Bgs4p. Las mutaciones fks de resistencia descritas para S. cerevisiae no confieren en Bgs4p un fenotipo de resistencia a Papulacandina y Enfumafungina pero si a Equinocandina y Cancidas. Se han definido dominios de hipersensiblidad a los antifúngicos en las tres proteínas Bgs, que no se corresponden con una alteración de la actividad enzimática ß(1,3)glucán sintasa. Los fenotipos del mutante bgs1fks2-1sugieren que Bgs1p es responsable, de otros procesos tales como la correcta formación de un único anillo contráctil. La ausencia de marca interna de septo primario en todos los mutantes de Bgs3p sugiere que Bgs3p podría ser responsable de la síntesis del glucano lineal y del septo primario, actuando después de que Bgs1p haya iniciado la síntesis de dicha estructura. Bgs4p parece ser el responsable de la actividad ß(1,3)glucán sintasa mayoritaria detectada in vitro. Las mutaciones de Bgs4p apoyan la idea de que la función principal de esta proteína es el mantenimiento de la integridad celular, principalmente durante la septación. El defecto en degradación del septo de algunos mutantes de Bgs4p sugiere que esta proteína regularía la localización y/o la actividad de componentes esenciales en el proceso de separación celular.