Nt-3 in cardiovascular pathologies

Resumen

La NT-3 y su receptor TrkC son puntos clave en la formación del corazón y los vasos durante la etapa embrionaria. Sin embargo, el papel de la NT-3 como modulador de las funciones cardiovasculares en la edad adulta no ha sido investigado con detalle. El objetivo de la presente Tesis es determinar la expresión de NT-3 y TrkC en el sistema cardiovascular humano y de roedores, así como el papel de la vía NT-3/TrkC como moduladora de las funciones cardiovasculares y su relación con las enfermedades a este nivel. Para ello, se cuantificó la expresión génica y proteica de NT-3 y TrkC, en tejidos humanos y de roedores, así como en células humanas cardiacas y aorticas. Los resultados muestran que los vasos expresan niveles elevados de NT-3 y su receptor TrkC, mientras que los niveles de expresión obtenidos en células son menores. A continuación, se analizó el papel funcional de la vía NT-3/TrkC en vasos y en líneas celulares humanas. En primer lugar, se examinó el efecto de la NT-3 en la migración celular y en el proceso angiogénico, en células endoteliales humanas: aorta, arteria coronaria y microvasculatura coronaria. Los resultados indican que la NT-3 no modifica significativamente la migración o la formación de nuevos túbulos En segundo lugar, se examinó el papel de la NT-3 en el tono vascular y la influencia del endotelio o del tejido adiposo perivascular (PVAT). Los resultados señalan una respuesta vasodilatadora parcial de NT-3 que depende de la liberación endotelial de NO en la aorta, pero no en la arteria caudal de rata. El inhibidor del receptor Trk, K252a, no modifica la respuesta vasodilatadora mediada por NT-3, lo que indica que no actúa a través de los receptores TrkC. Se observa además una actividad anti-contráctil del PVAT frente a la vasodilatación provocada por la acetilcolina, los agonistas de los adrenoceptores beta (b-AR) y la NT-3, aunque las diferencias no alcanzaron significación estadística en este último caso. Otro objetivo fue analizar las consecuencias de los cambios en la expresión de NT-3 a nivel cardiovascular en ratones modificados genéticamente, con expresión parcial o eliminación endotelial de NT-3. En estos ratones se observó una disminución de la presión arterial, y una pérdida de la respuesta relajante mediada por los b3-AR en la aorta, evidenciando que un déficit en la expresión de NT-3 en los vasos, conduce a una alteración en la función del b3-AR. El último objetivo fue analizar los cambios de expresión de b3-AR, NT-3 y TrkC en ventrículo izquierdo de pacientes con insuficiencia cardiaca, observando una mayor expresión génica y proteica de NT-3 y TrkC en estos pacientes, así como una correlación positiva entre los niveles de mRNA de NT-3 y los tres subtipos de b-AR y una correlación positiva entre la expresión de NT-3 y la fracción de eyección del ventrículo izquierdo, lo que evidencia un posible efecto protector cardiovascular de la NT-3 en el corazón. Finalmente, se ha encontrado una correlación inversa entre la expresión de NT-3 en ventrículo izquierdo de pacientes con insuficiencia cardiaca y el índice de masa corporal. Por ello, el siguiente paso fue analizar la expresión de NT-3 y TrkC en tejidos cardiovasculares de modelos animales con obesidad (rata Zucker obesa), para establecer si existe un paralelismo con los resultados en humanos. Los resultados indican niveles reducidos de NT-3 y b3-AR en riñones de ratas obesas, en comparación con las no obesas. Esto demuestra que los cambios en la expresión de NT-3 y b3- AR se producen en paralelo también en este modelo de obesidad en ratas, y supone un paso inicial para investigar la relación entre la NT-3 y la obesidad.