Clonación y caracterización de la región génica "secE-nusG-rplK-rplA" de "Corynebacterium glutamicum". Estudio del efecto de la anulación del gen "rplA"

Zusammenfassung

Tradicionalmente las corinebacterias son consideradas como microorganismos de gran interés industrial para la producción de aminoácidos y otros metabolitos. Dentro este grupo es C.glutamicum el microorganismo más estudiado, debido a su gran potencial para producir aminoácidos tales como el L-glutamato, L-lisina y L-isoleucina, que en el mercado genera millones de dólares (Schäfer et al., 2001). El interés comercial de C.glutamicum ha dado lugar a la existencia de varios grupos de investigación dedicados al estudio de la genética y la biología molecular de este microorganismo. Esta memoria recoge los resultados obtenidos en el estudio de la agrupación génica SecE-nusG-rplK-rplA. La importancia de esta agrupación reside en la presencia en ella de los genes rplK y rplA, que codifican proteínas ribosomales implicadas en la respuesta estricta. Hasta el inicio de este trabajo la respuesta estricta en C.glutamicum se hallaba poco caracterizada. Existían estudios sobre el gen relA (Wehmeier et al., 1998), que codifica la molécula efectora de la respuesta estricta (ppGpp), pero no así del gen rplK, cuya proteína L11 lleva a cabo la activación del gen relA (Yang e Ishiguro, 2001). Por tanto el planteamiento general de este trabajo fue determinar si el operón L11 descrito en otros microorganismos tenía su homólogo en C.glutamicum, y en caso afirmaitvo, llevar a cabo el análisis del operón en profundidad, mediante el análisis transcripcional, de las regiones promotoras y terminadoras. Además se trato de determinar el tipo de regulación que se da en este operón.