Caracterización del promotor y de la función de mtch1

Resumen

Mtch1 (Mitochondrial carrier homolog 1) fue identificada como una proteína que interacciona con la Presenilina 1 (PS1), razón por la cual también es conocida como PSAP (Presenilin 1-associated protein). PS1 es una proteína implicada en la enfermedad de Alzheimer, lo cual convierte a Mtch1 en un importante objeto de estudio. Desde su identificación el estudio de esta proteína ha cobrado mayor interés, descubriéndose su importancia en otros procesos biológicos y/o patológicos. La sobreexpresión de esta proteína en cultivo celular induce cambios morfológicos característicos de apoptosis. La apoptosis está estrechamente relacionada con variaciones en la expresión de los genes, siendo de gran importancia conocer los factores de transcripción que regulan a los mismos. Según la secuencia nucleotídica depositada en GenBank bajo el numero de acceso NM 001271641, existe al menos un sitio de inicio de la transcripción localizado a 378 pb aguas arriba del primer ATG (+1) de MTCH1. En los trabajos que han conducido a esta tesis doctoral hemos analizado 404 pb del promotor de MTCH1 encontrando que éste carece de cajas generales de la transcripción como caja TATA y caja CAAT, pero contiene tres cajas GC, de las cuales una de ellas está conservada y es muy importante en la transcripción. Asimismo, hemos demostrado que MTCH1 tiene un promotor mínimo funcional que se encuentra comprendido en una región de 69 pb en posición 5' con respecto a +1. Finalmente, en lo que corresponde a la caracterización del promotor de MTCH1, hemos encontrado cuatro sitios de unión a Egr-1 (EBS) en el promotor de MTCH1. Egr-1 se une a los EBS 3 y 4 (los más próximos a +1) en células HEK293T y su eliminación reduce la actividad promotora indicando su implicación en la transactivación. En concreto, en esta tesis demostramos que Egr-1 es capaz de activar la expresión de Mtch1 mediante la sobreexpresión de Egr-1 y la inducción de este con UV o doxorrubicina, dos agentes que producen daño en el DNA y apoptosis. También cabe destacar que la interferencia de RNA de Egr-1 disminuye los niveles de Mtch1. Estos resultados indican un posible papel para Mtch1 en la respuesta celular al daño en el DNA.