Splicing anómalo de los genes brca1 y brca2 y susceptibilidad genética a cáncer de mama y ovario

Zusammenfassung

El espectro de predisposición genética a cáncer de mama y ovario ha sido resuelto tan solo parcialmente. Un gran número de mutaciones han sido descritas, principalmente sustituciones de nucleótido y pequeñas inserciones o deleciones en la región exónica de los genes de alta susceptibilidad a cáncer de mama y ovario hereditario BRCA1 y BRCA2. Sin embargo el efecto en la enfermedad de la mayoría de mutaciones no truncantes en estos genes aún es desconocido. El efecto deletéreo de una mutación predicho en base a la traducción directa del cambio que supone la mutación en la secuencia génica puede ser radicalmente alterado si la mutación induce un cambio en el procesamiento por splicing del transcrito primario. Este trabajo desarrolla un método de análisis funcional del efecto de mutaciones en el splicing basado en la construcción y mutagénesis dirigida de minigenes híbridos y su ensayo en células HeLa y MCF10A, lo que reduce drásticamente la necesidad de contar con muestras biológicas de ARN de los enfermos portadores de mutaciones para ensayar mediante RT-PCR su posible efecto en el splicing del transcrito primario. Hemos ensayado el efecto de 103 variantes en el Splicing, de las que hasta 36 provocaban alteraciones en el splicing. Hasta el 60% de las familias analizadas en nuestro laboratorio con un test BRCA1+ son portadoras de una mutación que afecta al splicing, lo que es indicador de la importancia de las alteraciones de este mecanismo de procesamiento en la enfermedad. Hemos comprobado que mutaciones de muy distinto tipo provocan alteraciones en el splicing tanto en linfocitos de pacientes portadores como en células transfectadas con los minigenes mutantes construidos. Tras discutir los posibles efectos que la presencia de distintos transcritos incorrectamente procesados, puede tener sobre la predicción de patogeneicidad de las distintas mutaciones proponemos que la toma en consideración de los defectos en el splicing puede aumentar el porcentaje de casos de cáncer de mama y ovario hereditario explicados por mutaciones en los genes BRCA1 y BRCA2 y que el modelo teórico de cáncer de mama y ovario hereditario debe ser en consecuencia revisado.