Estudio del papel de las rho-quinasas en la respuesta inflamatoria inducida por el alcohol

Resumen

El consumo crónico y excesivo de alcohol provoca un exceso de respuesta inflamatoria que ocasiona daño tisular (p. ej., hepatopatía alcohólica o neuroinflamación). No se conocen completamente los mecanismos de esta activación de la respuesta inmune, pero pueden ser relevantes ciertos mediadores como las rho-quinasas, dado que estas quinasas son capaces de inducir la diferenciación de las células del sistema monocito/macrófago hacia un fenotipo pro-inflamatorio con secreción de citoquinas como el TNF-alfa. Los principales objetivos de esta tesis han sido el estudio de la activación de las rho-quinasas en la respuesta inflamatoria ligada al consumo excesivo de alcohol y el análisis de la influencia de polimorfismos genéticos en esta vía en la susceptibilidad al daño orgánico inducido por alcohol. Para ello, se han realizado tanto estudios in vivo [con la medida de la actividad de las rho-quinasas mediante la expresión de ARNm en sangre periférica así como el estudio de la relación de la expresión de las rho-quinasas con la expresión de los TLR y la secreción de citoquinas pro-inflamatorias (TNF-α IL-8, IL1-β) tras un consumo intensivo de alcohol respecto a controles sanos], como estudios in vitro (analizando la expresión de rho-quinasas tras la exposición a etanol en células mononucleadas de sangre periférica expuestas a etanol y en astrocitos de ratón expuestos a etanol). Asimismo, se ha llevado a cabo un estudio genético de asociación de variantes alélicas en los genes de las quinasas ROCK1 y ROCK2 en relación con la presencia de alcoholismo o hepatopatía alcohólica. Todo ello, nos ha permitido definir con mayor claridad el papel de las rho-quinasas en la respuesta inflamatoria ligada al consumo excesivo de alcohol, descubriendo que: 1. El consumo agudo e intensivo de alcohol produce un aumento de la expresión en sangre del ARNm de ambas isoformas de las rho-quinasas, sobre todo en menores de 27 años y mujeres. 2. El aumento de la expresión del ARNm de la isoforma ROCK1 tras el consumo intensivo de alcohol se correlaciona de forma estadísticamente significativa con la expresión de ARNm de IL1-β, Il-8 y TLR4. 3. Existe un aumento de expresión del ARNm de la isoforma ROCK1 en las células mononucleadas expuestas a etanol, lipopolisacárido (LPS) y, en mayor medida, en la exposición conjunta a etanol y LPS. 4. Se constata un aumento de expresión del ARNm de la isoforma ROCK1 en astrocitos de ratón expuestos a etanol, pero no a LPS o a la combinación de ambas sustancias. 5. No se ha encontrado una asociación clara entre los polimorfismos rs35996865 del gen ROCK1, o rs2230774 y rs978906 del gen ROCK2 con la presencia de hepatopatía alcohólica o alcoholismo. 6. La presencia del alelo T del polimorfismo rs35996865 del gen ROCK1 se asocia con una mayor expresión de ARNm de ROCK1 en la sangre de individuos jóvenes tras el consumo agudo e intensivo de alcohol