Caracterización de mybbp como un nuevo gen supresor de tumores

Resumen

El microambiente tumoral es un entorno heterogéneo y dinámico que se caracteriza por las constantes interacciones entre las células tumorales y las células del estroma y los continuos cambios en la distribución de nutrientes esenciales para el desarrollo del tumor. Frecuentemente se producen deficiencias locales y/o temporales en la vascularización del tumor que provocan la ausencia de glucosa, de oxígeno o de otros nutrientes esenciales para el desarrollo del mismo, generando situaciones con altos niveles de estrés celular. La caracterización de los mecanismos moleculares que favorecen la adaptación de las células tumorales a entornos críticos permitiría identificar nuevas dianas con potencial antitumoral. Por este motivo, realizamos un rastreo genético de pérdida de función en ausencia de glucosa en el que identificamos el gen MYB binding protein 1A (MYBBP1A). MYBBP1A es un regulador de factores de transcripción implicado en la regulación de varios procesos biológicos esenciales. En este trabajo hemos analizado muestras de tumores humanos, confirmando que la pérdida de MYBBP1A es un evento genético que se produce en tumores humanos, especialmente en tumores renales. Hemos analizado la expresión de MYBBP1A en una cohorte de 97 pacientes de cáncer renal, en la que hemos observado que la pérdida o reducción de la expresión de MYBBP1A se produce en el 8% de los tumores. Esta pérdida estaba asociada a la aparición de metástasis y peor pronóstico en términos de supervivencia libre de enfermedad y supervivencia global. En base a esta observación y a que se ha descrito que la degradación de MYBBP1A está regulada por pVHL, que se pierde frecuentemente en tumores renales, hemos utilizado líneas celulares de carcinoma renal para estudiar la posible función de MYBBP1A como supresor tumoral. Para estudiar el mecanismo molecular a través del cual MYBBP1A participaría en el proceso de tumorigénesis hemos analizado el efecto de la sobreexpresión y del silenciamiento de MYBBP1A en líneas celulares de carcinoma renal. La sobreexpresión de MYBBP1A suprime el crecimiento celular en todas las líneas celulares utilizadas independientemente del contexto molecular. Por otro lado, el silenciamiento de MYBBP1A induce el aumento de algunas propiedades tumorales en las líneas celulares que expresan c-MYB y no expresan pVHL. En estas líneas la reducción de la expresión de MYBBP1A induce la activación de c-MYB, conduciendo a la activación de la transcripción de sus genes diana CD34 y CXCR4 y al aumento del fenotipo equivalente a célula madre tumoral. Además de inducir el fenotipo de célula madre, hemos encontrado que c-MYB activa la transcripción de PGC-1α. Así mismo, la reducción de MYBBP1A activa a PGC-1α directa e indirectamente. De forma directa, la reducción de MYBBP1A permite la actividad de PGC-1α y de forma indirecta aumenta los niveles de PGC-1α a través de la activación de c-MYB. Finalmente, la activación de PGC-1α conduce al cambio metabólico de glucólisis a OXPHOS, el cual es más eficiente para producir ATP en condiciones de limitación de glucosa. Por tanto, la combinación de estos dos efectos como resultado de la disminución de la expresión de MYBBP1A proporciona una ventaja selectiva a las células tumorales. Además, hemos analizado la expresión de MYBBP1A y su correlación con la expresión de genes de vías de señalización implicadas en los procesos de iniciación y desarrollo tumoral. Hemos observado que la expresión de MYBBP1A correlaciona negativamente con la expresión de genes involucrados en el fenotipo de célula madre, identificando un subgrupo de carcinomas de células renales de células claras con un patrón de expresión característico. También hemos encontrado un conjunto de genes regulados transcripcionalmente por c-MYB cuya expresión correlaciona negativamente con MYBBP1A y positivamente con PGC-1α. Además, hemos identificado un subgrupo de tumores, en torno al 8% del total de las muestras, con un patrón de expresión característico: bajos niveles de expresión de MYBBP1A y altos niveles de expresión de PGC-1α y de los genes diana de c-MYB. Por último, hemos observado que la expresión de MYBBP1A correlaciona negativamente con la expresión de genes del ciclo de los ácidos tricarboxílicos. También hemos encontrado que el 9% de las muestras tumorales presentan bajos niveles de expresión de MYBBP1A y altos niveles de expresión de los genes del ciclo de los ácidos tricarboxílicos. Por tanto, estos análisis bioinformáticos confirman nuestros datos experimentales.