Efectos del óxido nítrico en la diferenciación de monocitos de sangre periférica a células dendríticas

Resumen

El objetivo de este trabajo es determinar el efecto del óxido nítrico (NO) en la diferenciación de monocitos a células dendríticas y en su posterior maduración. Los monocitos humanos CD14+ CD1a- CD80- CD40- CD86+ HLA-DR+, aislados de voluntarios sanos, se diferenciaron con GM-CSF e IL-4 a células dendríticas CD14- CD1a+ CD80+ CD40+ CD86+ HLA-DR+. La adición de distintos donadores de NO al comienzo de la diferenciación produjo un incremento selectivo de la subpoblación de células dendríticas CD80+ CD1a+ HLA-DR+. Las actividades arginasa II y sintasa inducible de óxido nítrico (iNOS) se detectaron en los monocitos y en las células dendríticas. Los donadores SIN-1 y DETA-NO aumentaron significativamente la actividad iNOS respecto a las células dendríticas control, aunque no se observaron cambios ni en la actividad arginasa ni en la expresión de arginasa II. Los peroxinitritos mostraron un efecto tóxico superior al óxido nítrico y esta toxicidad resultó mayor en la diferenciación de monocitos que en la maduración de las células dendríticas. La adición de L-NMMA el primer día de la diferenciación incrementó la actividad NOS en las células dendríticas. El NO produjo una intensa nitración de proteínas; se detectó una banda de 90 kDa que aparece en células dendríticas y no en monocitos. Además, todas las células CD1a+ y CD83+ mostraron una homogénea e intensa nitración de proteínas. La maduración con GM-CSF y TNF-alfa produjo la aparición de dos subpoblaciones; HLA-DR++ CD83+ y HLA-DR+ CD83-, La estimulación con LPS e IFN-gamma produjo una población homogénea HLA-DR++ CD83+. Las actividades arginasa e iNOS se detectaron en las células dendríticas maduras. La adición de DETA-NO en la maduración produjo un incremento significativo de la actividad iNOS, lo que podría estar relacionado con una mayor expresión del CD83 en estas células. Los resultados sugieren una relación entre el fenotipo, la pro