Producción de células similares a la glia de Schwann a partir de células madreneurales, para la reparación de lesiones medulares en rata

Resumen

CULTIVOS CELULARES Se indujo un fenotipo parecido a células de Schwann a partir de neuroesferas del cuerpo estriado de embrión de rata y de bulbo olfatorio de rata adulta. El crecimiento de las neuroesferas se sustentó con dos tipos de medios definidos: A,- Medio definido para células madre adicionado de EGF + FGF. B,- Medio neurobasal + suplemento B27 + Glu + Gln + EGF + FGF. Las células precursoras fueron expuestas a varios medios de cultivo definidos. Se diferenciaron en células similares a las células de Schwann inmunoreactivas para los antígenos p75, O4 y GFAP. Este fenotipo se expresó a partir de las 48 horas en cultivo, tiempo en el que otros tipos celulares iniciaron su diferenciación o oligodendroglia (A2B5+) y a precursores neuronales positivos a beta3 tubulina. Estos marcadores así como RIP y O1 se expresaron mejor a los 10 días en cultivo. El medio más efectivo para la diferenciación a fenotipo similar a glía de Schwann fue el medio condicionado por glía envolvente de bulbo olfatorio (MCGE), lo que indica que la diferenciación celular pudiera estar guiada por factores autocrinos de la glía envolvente. Las células p75 positivas provenientes de neuroesferas de bulbo olfatorio de rata adulta, son capaces de interaccionar con neuronas de ganlio de la raíz dorsal embrionarias. Se observaron varias formas de interacción entre glía y neuronas: envolvieron el soma neuronal o axones. Las células similares a la glía radial se disponían en paralelo a las neuronas con sus pliegues membranosos. La glía bipolar parecía servir de guía a la neuritas en crecimiento. LESIONES MEDULARES Fueron caracterizados los siguientes modelos de lesión medular en la rta: contusión moderada/severa, hemisección y transección. Posteriormente ensayamos diferentes tratamientos destinados a la reparación de las lesiones. Los tratamientos consistieron, para los animales lesionados por contusión y hemisección, en el t