Transformación y deleción génica en "Streptomyces alboniger" estudio sobre la función de los genes napH y pur8 del cluster pur

Zusammenfassung

Se logró desarrollar un protocolo para introducir ADN en Streptomyces alboniger. Esto permitió analizar la función de dos de los genes que participan en la ruta de biosíntesis de puromicina en el propio organismo productor. El análisis de la función de los genes napH y pur8 se realizó gracias a la obtención de mutantes por deleción génica. Se obtuvieron mutantes simples y dobles en napH y pur8. Con los resultados que se tienen hasta el momento se puede inferir que la deleción de los primeros siete dominios transmembrana de pur8 afecta la función de conferir resistencia a puromicina en el organismo productor. Con respecto a napH se determinó que la deleción de este gen afecta la expresión de los restantes genes de la ruta incluyendo pur8 que está codificado en un transcrito monocistrónico y que se transcribe en forma independiente de los genes de biosíntesis. Lo que implica que de alguna manera existe una regulación de la expresión ya sea por que napH o bien alguno de los intermediarios de la ruta desencadena una señal que controla la expresión de la ruta.