Estudio de la accion citotoxica de clostridium difficile en relacion con diversos factores

Abstract

CLOSTRIDIUM DIFFICILE ES CONSIDERADO COMO AGENTE ETIOLOGICO DE DIVERSAS ENFERMEDADES INTESTINALES, EN CUYO DESARROLLO INTERVIENEN LAS TOXINAS QUE ESTE MICROORGANISMO PRODUCE. DADO QUE AUN NO SON CONOCIDOS LOS FACTORES QUE DETERMINAN LA PRODUCCION DE ESTAS TOXINAS, EN ESTE TRABAJO SE ESTUDIA LA POSIBILIDAD DE QUE SEA MEDIADA POR BACTERIOFAGOS. PARA ELLO, SE TRATA DE RELACIONAR LA PRESENCIA DE BACTERIOFAGOS CON LA CITOTOXICIDAD DE LAS CEPAS, PASANDO POR UNA ESTANDARIZACION DE ESTA METODOLOGIA, DE INTERES DESDE EL PUNTO DE VISTA CLINICO DEBIDO A SU APLICACION COMO METODO DIAGNOSTICO DE LABORATORIO EN DICHAS ENFERMEDADES. LA ESTANDARIZACION, CONSIDERADA COMO PRIMER OBJETIVO DEL TRABAJO, SE CONSIGUE ESTUDIANDO LA INFLUENCIA DE DIVERSOS FACTORES SOBRE LA APARICION Y DESARROLLO DEL EFECTO CITOPATICO CAUSADO POR LAS TOXINAS EN DIFERENTES LINEAS CELULARES. SE ESTUDIO LA INFLUENCIA DEL TIEMPO DE EXPOSICION, TIPO CELULAR, CANTIDAD DE TOXINA, CONDICIONES DE NEUTRALIZACION DEL EFECTO Y TIEMPO DE LECTURA DE RESULTADOS. SEGUN LOS RESULTADOS OBTENIDOS, C. DIFFICILE LIBERA LAS TOXINAS AL MEDIO DE CULTIVO DURANTE TODAS LAS FASES DE SU CRECIMIENTO, Y LA DETECCION DE SU ACTIVIDAD CITOTOXICA MEDIANTE EL EMPLEO DE CELULAS MCCOY A UNA DENSIDAD DE 5.000 CELULAS/0,3 CM2, CON 24 HORAS DE EXPOSICION A LA TOXINA Y NEUTRALIZACION DEL EFECTO CON 6,25 U.I. DE ANTITOXINA DE C. SORDELLII, AÑADIDAS PREVIAMENTE A LA ADICION DE LAS TOXINAS, CONSTITUYEN UNAS CONDICIONES EN LAS QUE LA TECNICA ES ALTAMENTE REPRODUCIBLE. NO SE ENCONTRO UNA RELACION SIGNIFICATIVA ENTRE LA PRESENCIA DE BACTERIOFAGOS Y LA CITOTOXICIDAD DE LAS CEPAS, NI GLOBALMENTE, NI PARA NINGUNA DE LAS LINEAS CELULARES ESTUDIADAS.