Aislamiento y caracterización de una estirpe de "Escherichia coli" inmutable por nitrosoguanidina

Resumen

En esta Tesis se ha abordado el estudio del mecanismo de acción de la nitrosoguanidina mediante el aislamiento y posterior caracterización de una estirpe inmutable por nitrosoguanidina. Se concluye que: ... 39;serif'; font-size: 12pt">1. En la mutagénesis por nitrosoguanidina interviene una función celular determinada por el gen inm, identificado en esta Tesis siguiendo un procedimiento original, y localizado en el número 79,5 del mapa genético de Escherichia coli. Las estirpes que llevan una mutación en el gen inm son muy escasamente mutables por la nitrosoguanidina.2. La función celular determinada por el gen inm es específica para la acción mutagénica de la nitrosoguanidina y no interviene en la inducción de daños letales.3. La mutación inm no afecta a la mutagénesis espontánea, ni por metanosulfonato de etilo, ni por ultravioleta, ni al sistema de reparación especial inducido por agentes alquilantes.4. el ADN de células tratadas con nitrosoguanidina se aísla en fragmentos de menor peso molecular que le ADN de células no tratadas.5. La actividad reparadora inducida por nitrosoguanidina no actúa sobre la mayoría de las metilaciones, sino sobre otro tipo de daño.6. Proponemos que el gen inm determina un componente, hasta ahora desconocido, de la maquinaria de replicación. La nitrosoguanidina induce mutaciones en la zona en replicación por actuar sobre el producto normal del gen inm, p(inm), el cual causa numerosos errores cuando se reanuda la replicación tras la acción de la nitrosoguanidina. Estos errores son reparados por varios sistemas de reparación distintos, incluyendo el sistema de reparación de emergencia dependiente de recA y lexA, notorio por su escasa fidelidad. Las mutaciones se deben a errores no corregidos o a errores defectuosamente corregidos por el sistema de reparación de emergencia.