Functional characterization of RHOA mutations in peripheral T-cell lymphomas

Resumen

RHOA es una pequeña GTPasa que pertenece a la subfamilia de proteínas RHO. Durante los últimos años se han identificado mutaciones de RHOA en tumores sólidos y hematológicos. Sin embargo, sus funciones patobiológicas siguen estando mal caracterizadas hasta el momento. En esta tesis hemos caracterizado funcionalmente estas mutaciones, demostrando que la mayoría de ellas conducen a la inactivación de la actividad GTPasa de la proteína. Centrándonos en las mutaciones RHOA descritas en los linfomas de células T periféricas, hemos demostrado que activan la vía NFAT independientemente de su actividad canónica. Esta actividad neomórfica depende de PLCɣ1, SLP76 y LAT. Los análisis proteómicos identificaron a RAP1GDS1 como un efector clave para la función neomórfica de los mutantes RHOA. Los tumores impulsados por RHOAG17V son sensibles a la inhibición farmacológica de la activación de NFAT. En conjunto, nuestros hallazgos revelan nuevas funciones patobiológicas de RHOA y amplían el conocimiento actual sobre el papel de esta proteína en los linfomas periféricos de células T. Estos datos han revelado una función inesperada, de tipo neomórfico, de los mutantes RHOA que se encuentran en los linfomas periféricos de células T. También señalan nuevas oportunidades terapéuticas para los pacientes con linfoma periférico de células T. [ES]En este estudio se caracterizaron las mutaciones asociadas a RHOA en tumores. Se realizaron ensayos utilizando luciferasa para evaluar el efecto de las mutaciones en la actividad canónica de RHOA, encontrando que las mutaciones de RHOA pueden clasificarse en tres categorías funcionales: mutaciones similares a WT, mutaciones de ganancia de función (GOF) y mutaciones de pérdida de función (LOF). En cuanto a la localización en la estructura de la proteína, la mayoría de las mutaciones ubicadas en los dominios de cambio fueron principalmente LOF, mientras que las mutaciones ubicadas en los dominios de unión al GTP podrían exhibir efectos tanto GOF como LOF.